Испытания в изоляторе для проверки стерильности и испытания в чистой комнате: сравнение контрольных процедур

Выбор между изолятором для тестирования на стерильность и технологическим процессом в открытой чистой комнате — это не сравнение классов чистоты помещений или маркировки оборудования. Это решение о том, где относительно физического барьера происходит критическое манипулирование, и какие меры контроля должны обеспечивать микробиологическую безопасность в случае отсутствия или наличия этого барьера. Ошибка в этом вопросе не проявляется сразу; она становится очевидной, когда какой-либо этап вмешательства, перемещения или извлечения проверяется на соответствие данным квалификации, требуемым методом испытаний.

Границы контроля в изоляторе и технологическом процессе открытой чистой комнаты

Основной вопрос при проведении испытаний на стерильность заключается в том, где именно происходят критические манипуляции по отношению к герметичному барьеру, поскольку именно это место определяет, какие контрольные образцы выполняют микробиологическую функцию. В изолятор для проверки стерильности, критические операции — мембранная фильтрация, перенос среды, работа с исследуемым образцом — происходят внутри закрытого корпуса, который изолирует их от прямого доступа оператора. Оператор работает в перчатках или полукостюмах, а не находясь в одном и том же открытом пространстве, что и исследуемый объект. Этот барьер не устраняет необходимость контроля вокруг него; он просто перемещает место, где контроль должен быть наиболее строгим. Изолятор по-прежнему зависит от определённых интерфейсов с окружающим помещением — как материал поступает внутрь и выходит наружу, как помещение поддерживает собственную среду изолятора — а также от рабочих процедур, регулирующих использование перчаток, настройку оборудования и последовательность вмешательств.

В открытом рабочем процессе чистой комнаты вокруг самой манипуляции отсутствует закрытое ограждение. Оператор выполняет критические этапы в том же объёме воздуха, который обеспечивает помещение, с соблюдением требований к одежде, воздушным потокам и дисциплине персонала, установленных в рабочих процедурах помещения. В результате большая часть ответственности за микробиологический контроль ложится на состояние помещения, на практику персонала и на точную последовательность действий, в которой происходят перемещения материалов и оператора. Если процедуры объекта и дисциплина персонала постоянно находятся под надлежащим контролем, открытый рабочий процесс может обеспечить проведение испытания; если же эта дисциплина нестабильна, то ограничивающим фактором становится воздействие открытого пространства на критические манипуляции, поскольку отсутствует барьер, компенсирующий возможные нарушения.

Это различие меняет критерии, по которым покупателю следует проводить оценку. Сравнивать изолятор с чистой комнатой, опираясь исключительно на классификацию воздуха, — значит упускать суть: ценность изолятора заключается в барьере, окружающем зону манипуляций, а не в более высоком классе чистоты помещения, и адекватность чистой комнаты также не определяется одной лишь её классификацией. Практическое сравнение заключается в том, какой путь фактически проходят исследуемый образец, оператор и отходы, а также в том, находится ли барьер на этом пути в той точке, где риск загрязнения для испытания максимален. Проект с высокой интенсивностью испытаний, большим количеством операторов или изменчивыми условиями укомплектования персоналом сам по себе не предполагает преимущества одной схемы перед другой — решающим фактором является то, насколько последовательно можно поддерживать меры контроля при открытом рабочем процессе по сравнению с тем, насколько объект способен обеспечить функционирование интерфейсов барьера. Для конкретной рассматриваемой испытательной деятельности следует уточнить, какие меры контроля фактически предусматривает та или иная схема, а не исходить из предположения, что любое из обозначений гарантирует определённый результат.

Воздействие вмешательства во время тестирования, переноса и восстановления

Проверка стерильности — это не единичное действие, а последовательность операций, включающая доставку исследуемого объекта и материалов к месту проведения испытания, выполнение фильтрации или инокуляции, а также последующую утилизацию отходов и отбор проб. Каждый этап этой последовательности характеризуется собственным профилем воздействия, и выбор между изолятором и чистой комнатой влияет на то, как это воздействие контролируется на каждом этапе, а не только в момент фильтрации.

Передача материала в испытательную среду зачастую является этапом, наиболее чувствительным к выбранной схеме организации. В изоляторе передача осуществляется через специально предусмотренный порт или стыковочный интерфейс, предназначенный для сохранения целостности барьера во время прохождения материала. Сам метод передачи становится частью системы контроля: если интерфейс передачи или связанная с ним процедура не соответствуют перемещаемому материалу, эффективность барьера во время собственно испытания может быть сведена на нет еще до начала манипуляций. В рабочем процессе открытой чистой комнаты передача, как правило, опирается на собственные меры контроля доступа в помещение и последовательность действий по переодеванию, протиранию рук или подготовке, которой следует персонал, поэтому строгое соблюдение этой последовательности заменяет собой механический барьер.

В ходе самого испытания степень воздействия оператора зависит от того, насколько манипуляция требует непосредственного вмешательства оператора и каким образом это вмешательство опосредуется. Изолятор опосредует его с помощью перчаток или рукавов, что вводит собственный интерфейс, требующий управления — целостность этих перчаток или рукавов становится частью механизма защиты испытания от оператора, и этот аспект рассматривается в проверка целостности перчаток для изоляторов, используемых при проверке стерильности. Открытый рабочий процесс обеспечивает осуществление вмешательства посредством техники работы персонала и близости к пациенту, причем определяющим фактором является навык оператора в соблюдении правил асептики, а не физический контакт.

Извлечение — удаление готовых испытательных материалов, отходов и любых загрязнённых предметов — сопряжено с риском воздействия, который порой недооценивается по сравнению с самим испытанием. Если установка представляет собой изолятор, извлечение обычно осуществляется обратно через тот же определённый интерфейс передачи, что позволяет сохранить целостность барьера до тех пор, пока материал не покинет контролируемое пространство. Если речь идет об открытой чистой комнате, процесс извлечения зависит от тех же процедур на уровне помещения, которые регулировали вход, и любое отклонение от этой последовательности в конце испытания влечет за собой те же последствия, что и отклонение в начале. Заказчик, оценивающий любую из этих схем, должен проследить весь путь — вход, манипуляции, выход — а не оценивать этап манипуляций в отрыве от остального, поскольку надежный барьер или хорошо контролируемое помещение на одном этапе не компенсируют слабый интерфейс на другом.

Классификация помещений, целостность защитных барьеров и обязанности по мониторингу

Классификация помещений и оценка эффективности барьеров отвечают на разные вопросы, и их смешение часто становится причиной нецелесообразных запросов о предоставлении доказательств. ISO 14644-1 устанавливает классификацию взвешенных в воздухе частиц для чистых помещений, чистых зон и сепарационных устройств — она показывает, насколько чист воздух с точки зрения количества частиц. Сама по себе она не определяет микробиологические классы, классы помещений по стандартам GMP или меры контроля загрязнения, не связанного с частицами. Условия в помещении или изоляторе могут соответствовать указанной классификации частиц, но при этом по-прежнему требовать отдельных микробиологических данных, прежде чем они смогут служить основанием для подтверждения результатов испытаний на стерильность. Любой, кто формирует пакет квалификационных данных, опираясь исключительно на данные классификации, упускает уровень доказательств, который фактически учитывает биологический риск.

Что касается самого изолятора как разделительного устройства, ISO 14644-7 устанавливает минимальные требования к проектированию, изготовлению, монтажу, испытаниям и утверждению. Данный стандарт касается конструктивных характеристик устройства и условий его ввода в эксплуатацию, но не пригодности конкретного приложения, работающего внутри него. Его сфера применения признана независимой от конкретного приложения, что означает, что в дополнение к нему по-прежнему действуют национальные и местные требования, а используемая редакция стандарта должна проверяться на соответствие текущему статусу ревизии. Изолятор, изготовленный и испытанный в соответствии с требованиями данного стандарта на уровне устройства, имеет подтверждение надлежащего качества конструкции; однако одно только это подтверждение не является доказательством того, что конкретный тест на стерильность, проводимый внутри него, будет соответствовать применимому методу, приведенному в фармакопее.

Этот нормативный уровень относится к самому методу проверки стерильности. Общая глава 71 USP определяет суть и сферу применения испытаний на стерильность и мембранной фильтрации как источника, однако конкретный пункт, регулирующий тот или иной аспект метода, необходимо проверять непосредственно, а не исходить из общей ссылки на наличие соответствующей главы.

Ответственность за мониторинг вытекает из этой многоуровневой структуры. В изоляторной схеме мониторинг, как правило, касается закрытой среды и рабочих характеристик самого барьера, в то время как к окружающему помещению по-прежнему предъявляются определенные требования к границе раздела. В схеме открытой чистой комнаты основная ответственность за мониторинг ложится на классифицированную среду помещения и персонал, работающий в ней, поскольку между ними отсутствует изолированная зона. Если в проекте изменяются допущения относительно частоты мониторинга или места его проведения, это меняет то, на какие доказательства стандарта фактически ссылаются — доказательства классификации, доказательства устройства или доказательства, основанные на методах фармакопеи, — и пакет квалификационных документов должен отражать это различие, а не рассматривать один сертификат в качестве доказательства других.

Биодеконтаминация, очистка и доказательства, связанные с попаданием веществ

Биодеконтаминация, плановая уборка и контроль поступающих материалов — это три отдельных вида деятельности, и каждая из них генерирует свой тип доказательств, которые должна обеспечивать система проверки стерильности. Биодеконтаминация направлена на внутреннюю среду изолятора или, в случае открытой системы, на помещение и его поверхности посредством четко определенного цикла, предназначенного для снижения биологической нагрузки до начала испытаний. Получаемые в результате доказательства касаются эффективности самого цикла деконтаминации — его распределения и однородности внутри закрытого или классифицированного пространства — и сами по себе не подтверждают, что конкретный испытуемый объект или переносимый предмет прошел надлежащую обработку, поскольку факторы на уровне отдельного предмета, такие как упаковка и конфигурация загрузки, влияют на результат независимо от общей эффективности цикла.

Регулярная уборка, напротив, направлена на поддержание состояния поверхностей в промежутках между циклами деконтаминации или между сеансами испытаний. В изоляторе процедуры очистки применяются внутри границ, ограничивающих источники повторного загрязнения между циклами очистки. В открытой чистой комнате очистка охватывает более обширную и открытую поверхность, а также больший объем воздуха, и интервал между очисткой и использованием более непосредственно зависит от движения персонала и перемещения материалов в этом же пространстве. Фактором, влияющим на значимость данных об очистке, является продолжительность периода незащищенного времени или открытого воздействия между проведением очистки и фактическим испытанием.

Доказательства, связанные с поступлением материалов, касаются того, как предметы изначально попадают в контролируемое или защищенное барьером пространство, и именно здесь пересекаются методы деконтаминации и передачи. Предмет, поступающий в изолятор через определенный переходной порт, несет в себе доказательства, связанные с эффективностью деконтаминации или биодеконтаминации данного порта для конкретного используемого метода передачи. Предмет, поступающий в открытую чистую комнату через шлюз для материалов или проходной канал, несет в себе доказательства, связанные с процедурой данного шлюза и практикой работы персонала, регулирующей его использование. В обоих случаях доказательства, которые должен собрать проект, должны относиться конкретно к фактически используемому способу поступления, а не представлять собой общее утверждение о том, что “помещение чистое” или “изолятор деконтаминирован”. Заказчик, готовящий пакет документов для квалификации, должен иметь возможность отследить для каждого класса предметов, поступающих в испытательную среду, какие доказательства деконтаминации или очистки применимы к данному конкретному пути поступления, поскольку пробел в одном пути поступления не устраняется убедительными доказательствами по другому пути.

Условия принятия решения для выбранной схемы испытаний

Выбор между изолятором для проверки стерильности и технологическим процессом в открытой чистой комнате обусловлен условиями, уже прослеженными с точки зрения воздействия при вмешательстве, барьерных интерфейсов и признаков проникновения, а не общим предпочтением одного обозначения перед другим. Если критическая манипуляция предполагает высокую степень непосредственного контакта, а объект не может гарантировать единообразную практику персонала на протяжении каждой сессии испытаний, барьер, отделяющий манипуляцию от оператора, напрямую устраняет данное воздействие, а интерфейсы вокруг этого барьера — переходные порты, перчаточные системы, стыковка с помещением — становятся доказательствами, необходимыми для квалификации проекта. Если объект может продемонстрировать последовательную, хорошо задокументированную дисциплину персонала и условия в классифицированном помещении, соответствующие профилю риска испытания, то открытый рабочий процесс может обеспечить проведение того же испытания, при этом в пакете квалификации основной упор делается на мониторинг помещения, процедуру одевания защитной одежды и последовательность манипуляций, а не на целостность барьера.

Ни одна из этих систем не может считаться адекватной исключительно на основании её классификации или типа оборудования. Классификация чистой комнаты по стандарту ISO 14644-1 свидетельствует о контроле содержания частиц, а не о микробиологической пригодности для проведения испытания; конструкция изолятора, соответствующая требованиям к устройствам стандарта ISO 14644-7, свидетельствует о надлежащей конструкции сепарационного устройства, но не о том, что конкретное испытание, проводимое внутри него, соответствует применимому методу, изложенному в фармакопее. Проекту по-прежнему необходимы доказательства, специфичные для данного метода и связанные с соответствующим разделом Общей главы 71 Фармакопеи США (USP), проверенные непосредственно, а не выведенные из общего содержания главы.

При окончательном выборе следует ориентироваться на фактический маршрут, по которому движутся материалы и операторы во время тестирования, перемещения и извлечения, сопоставляя его с тем, где объект может обеспечить наиболее надежный контроль — за физическим барьером с четко определенными интерфейсами или через открытое помещение с четко установленными процедурами. Проектная группа, оценивающая асептический изолятор или изолятор для проверки стерильности в этих целях, должна учесть в ходе анализа конкретную последовательность манипуляций в рамках данного испытания, этапы перемещения и извлечения образцов, а также имеющиеся данные о классификации помещения и контроле персонала, поскольку выбранная конфигурация и необходимые интерфейсы с окружающими помещениями напрямую зависят от того, как эта последовательность выполняется на практике, а не только от названия самого испытания.

Часто задаваемые вопросы

Q: Что следует проанализировать, прежде чем сравнивать изолятор с рабочим процессом тестирования в чистой комнате?
A: Опишите последовательность всех критически важных операций, вмешательств оператора, перемещений материалов и этапов утилизации. Для каждого этапа укажите, происходит ли он за физическим барьером или зависит от условий в помещении, действий персонала и операций, осуществляемых за пределами этой зоны.

Q: Устраняет ли использование изолятора для проверки стерильности необходимость контролировать взаимодействие с окружающим помещением?
A: Нет. Барьер отделяет критически важные операции от прямого доступа оператора, однако четко определенные интерфейсы помещения и рабочие процедуры по-прежнему остаются обязательными. В плане квалификации должно быть указано, какие средства управления применяются внутри барьера, а какие — за его пределами.

Q: Может ли классификация воздуха в чистом помещении сама по себе обеспечить микробиологический контроль при проведении испытаний на стерильность?
A: Нет. Стандарт ISO 14644-1 «Классификация воздуха» устанавливает классификацию взвешенных в воздухе частиц, а не микробиологические классы, классы помещений в соответствии с GMP или меры по контролю загрязнения, не связанного с частицами. Рассматривайте классификацию как один из источников доказательств и определите, какие дополнительные данные мониторинга и технологического процесса необходимы для выбранной схемы организации.

Q: Какие доказательства необходимо подготовить для подтверждения соответствия выбранной испытательной установки установленным требованиям?
A: Подготовьте документацию, соответствующую фактическим границам зоны контроля: границы помещений и рабочие процедуры, целостность барьерных систем (где это применимо), обязанности по мониторингу, а также запланированный подход к биодекontaminaции, уборке и ввозу материалов. Проверьте соответствие требований к методу соответствующим положениям фармакопеи и ознакомьтесь с применимыми национальными и местными нормами, касающимися данного проекта.

Q: Как выбрать между использованием изолятора и открытым технологическим процессом в чистой комнате?
A: Выберите схему, элементы управления которой можно четко определить, квалифицировать и поддерживать в рабочем состоянии на протяжении всего цикла реального тестирования и передачи. Сравните элементы управления барьером и интерфейсом изолятора с подходом для чистой комнаты, в котором в большей степени полагаются на состояние помещения, правила поведения персонала и соблюдение дисциплины при обращении с материалами, а затем задокументируйте доказательства, необходимые для выбранной схемы.