مختبرات المستويين الثالث والرابع للسلامة البيولوجية (BSL-3/4) هي مرافق حيوية مصممة للتعامل مع مسببات الأمراض الخطيرة وإجراء البحوث البيولوجية عالية الخطورة. يلعب البناء والمواد المستخدمة في هذه المختبرات دورًا حاسمًا في الحفاظ على السلامة البيولوجية والأمن البيولوجي. في هذا الدليل الشامل، سوف نستكشف الاعتبارات الأساسية للأرضيات ومواد الجدران في مختبرات BSL-3/4، مما يضمن أن هذه المرافق تلبي المتطلبات الصارمة للاحتواء والسلامة.
عندما يتعلق الأمر بتصميم وبناء مختبرات BSL-3/4، فإن كل التفاصيل مهمة. فمواد الأرضيات والجدران ليست مجرد عناصر معمارية؛ فهي خط الدفاع الأول ضد التلوث والخروقات المحتملة. يجب أن تتحمل هذه المواد بروتوكولات التنظيف الصارمة، وتقاوم التدهور الكيميائي، وتوفر سطحًا غير نافذ وغير قابل للاختراق لمنع تسرب العوامل الخطرة.
بينما نتعمق في عالم بناء مختبرات BSL-3/4، سنفحص المتطلبات المحددة للأرضيات ومواد الجدران، ونناقش أحدث الابتكارات في منتجات بناء الآمن الحيوي، ونقدم رؤى حول أفضل الممارسات للتركيب والصيانة. سواءً كنت مصمم مختبر أو مسؤول سلامة بيولوجية أو باحث يعمل في منشآت عالية الاحتواء، سيزودك هذا الدليل بالمعرفة اللازمة لاتخاذ قرارات مستنيرة بشأن المكونات الأساسية للبنية التحتية للمختبر.
يعد اختيار مواد الأرضيات والجدران المناسبة أمرًا بالغ الأهمية في مختبرات BSL-3/4، حيث يجب أن تشكل هذه الأسطح حاجزًا منيعًا ضد العوامل البيولوجية مع تحمل إجراءات إزالة التلوث المتكررة.
والآن، دعونا نستكشف الجوانب الرئيسية لأرضيات مختبر BSL-3/4 ومواد الجدران في المختبرات، ونتناول الأسئلة الأكثر إلحاحًا في هذا المجال.
ما هي الاعتبارات الأساسية لأرضيات المختبر BSL-3/4؟
عندما يتعلق الأمر بالأرضيات في مختبرات BSL-3/4، فإن المتانة والاحتواء أمران أساسيان. يجب أن تخلق الأرضيات سطحًا سلسًا يمنع إيواء الكائنات الحية الدقيقة ويسهل التنظيف وإزالة التلوث بسهولة.
تشمل الاعتبارات الرئيسية لأرضيات المختبر BSL-3/4 مقاومة المواد الكيميائية وعدم النفاذية والقدرة على تحمل المعدات الثقيلة وحركة الأقدام المتكررة. كما يجب أن تكون المواد غير مسامية وقادرة على الحفاظ على سلامتها في ظل بروتوكولات التطهير القاسية.
أحد أهم جوانب أرضيات المختبر BSL-3/4 هو التكامل مع أسطح الجدران. ويتحقق ذلك عادةً من خلال استخدام قواعد مغطاة مغطاة مدمجة تزيل الزوايا والشقوق التي يمكن أن تتراكم فيها الملوثات.
تُعتبر أنظمة الأرضيات القائمة على الإيبوكسي على نطاق واسع معيارًا ذهبيًا لمختبرات BSL-3/4 نظرًا لمقاومتها الفائقة للمواد الكيميائية وتطبيقها السلس وقدرتها على إنشاء سطح متجانس.
فيما يلي مقارنة بين مواد الأرضيات الشائعة المستخدمة في مختبرات BSL-3/4:
المواد | مقاومة المواد الكيميائية | المتانة | سهولة التنظيف | التكلفة |
---|---|---|---|---|
إيبوكسي | ممتاز | عالية | سهل جداً | عالية |
الفينيل | جيد | معتدل | سهولة | معتدل |
المطاط | عادل | معتدل | معتدل | معتدل |
البولي يوريثين | ممتاز | عالية | سهل جداً | عالية |
في الختام، يجب أن يعطي اختيار مواد الأرضيات لمختبرات BSL-3/4 الأولوية للسلامة وقابلية التنظيف وطول العمر. في حين أن التكاليف الأولية قد تكون أعلى بالنسبة للمواد الممتازة مثل الإيبوكسي، فإن الفوائد طويلة الأجل من حيث السلامة والصيانة غالبًا ما تبرر الاستثمار.
كيف تساهم مواد الجدران في السلامة البيولوجية في مختبرات BSL-3/4؟
تعتبر مواد الجدران في مختبرات BSL-3/4 مكونات حاسمة في نظام الاحتواء. يجب أن توفر سطحًا أملسًا غير مسامي مقاومًا للمواد الكيميائية وسهل التنظيف وقادرًا على تحمل البيئة المضغوطة التي غالبًا ما تكون مطلوبة في هذه الأماكن عالية الاحتواء.
تتمثل الوظيفة الأساسية لمواد الجدران في إنشاء حاجز منيع يمنع تسرب العوامل الخطرة. ويتحقق ذلك من خلال الاختيار الدقيق للمواد وتقنيات التركيب الدقيقة التي تقضي على أي نقاط اختراق محتملة.
بالإضافة إلى الاحتواء، يجب أن تدعم مواد الجدران أيضًا متطلبات النظافة الصارمة لمختبرات BSL-3/4. يجب أن تكون الأسطح غير قابلة للتساقط ومقاومة لنمو الميكروبات، مما يضمن عدم تحول الجدران نفسها إلى مصادر للتلوث.
تُعد الألواح البلاستيكية المقواة بالألياف الزجاجية ووحدات البناء الخرسانية المطلية بالإيبوكسي من بين أكثر مواد الجدران فعالية لمختبرات BSL-3/4، حيث توفر متانة ممتازة ومقاومة للمواد الكيميائية وقابلية للتنظيف.
دعونا نفحص بعض خيارات مواد الحائط الشائعة لمختبرات BSL-3/4:
المواد | مقاومة الصدمات | مقاومة المواد الكيميائية | قابلية التنظيف | تعقيد التركيب |
---|---|---|---|---|
ألواح FRP | عالية | ممتاز | سهل جداً | معتدل |
الإيبوكسي المغطى بالإيبوكسي CMU | عالية جداً | ممتاز | سهولة | عالية |
الفولاذ المقاوم للصدأ | عالية جداً | ممتاز | سهل جداً | عالية |
طلاءات عالية الأداء | معتدل | جيد | سهولة | منخفضة |
وختامًا، يجب أن يوازن اختيار مواد الجدران لمختبرات BSL-3/4 بين فعالية الاحتواء والمتانة والتطبيق العملي. في حين أن مواد مثل ألواح FRP ووحدات CMU المغلفة بالإيبوكسي تقدم أداءً فائقًا، قد يعتمد الاختيار المحدد على عوامل مثل الميزانية وقيود التركيب واللوائح المحلية.
ما الدور الذي يلعبه مانع التسرب في بناء مختبر BSL-3/4؟
تعتبر المواد المانعة للتسرب من المكونات الهامة في بناء مختبرات BSL-3/4، حيث تعمل كحاجز نهائي ضد الخروقات المحتملة في نظام الاحتواء. تُستخدم هذه المواد لملء الفواصل والفجوات والاختراقات في الأرضيات والجدران والأسقف، مما يضمن بيئة محكمة الغلق تمامًا.
لا يمكن المبالغة في أهمية المواد المانعة للتسرب في المعامل عالية الاحتواء. يجب أن تكون قادرة على تحمل التعرض للمواد الكيميائية، والحفاظ على المرونة لاستيعاب الحركة الهيكلية، وتوفير التصاق طويل الأمد لمختلف الركائز.
الاستخدام السليم للمواد المانعة للتسرب لا يقل أهمية عن اختيار المادة المانعة للتسرب نفسها. يجب أن يكون الفنيون على درجة عالية من المهارة في تطبيق هذه المواد لضمان التغطية الكاملة والالتصاق بجميع الأسطح، دون ترك أي مسارات محتملة لخروج الملوثات.
غالبًا ما تكون المواد المانعة للتسرب القائمة على السيليكون مفضلة في مختبرات BSL-3/4 نظرًا لمقاومتها الكيميائية الممتازة ومتانتها وقدرتها على الحفاظ على إحكام الإغلاق المرن تحت نطاق واسع من درجات الحرارة والضغوط.
إليك مقارنة بين أنواع المواد المانعة للتسرب الشائعة المستخدمة في مختبرات BSL-3/4:
نوع مانع التسرب | مقاومة المواد الكيميائية | المرونة | العمر الافتراضي | مقاومة الأشعة فوق البنفسجية |
---|---|---|---|---|
سيليكون | ممتاز | عالية | أكثر من 20 عاماً | ممتاز |
البولي يوريثين | جيد | معتدل | 10-15 سنة | جيد |
إيبوكسي | ممتاز | منخفضة | أكثر من 15 عاماً | عادل |
أكريليك | عادل | معتدل | 5-10 سنوات | جيد |
في الختام، يتطلب اختيار واستخدام المواد المانعة للتسرب في مختبرات BSL-3/4 دراسة دقيقة لخصائص الأداء والتوافق مع مواد البناء الأخرى. يعتبر مانع التسرب الصحيح، الذي يتم تطبيقه بشكل صحيح، ضروريًا للحفاظ على سلامة نظام الاحتواء.
كيف تؤثر متطلبات إزالة التلوث على اختيار المواد؟
تعد إجراءات إزالة التلوث جانبًا حاسمًا في عمليات المختبر BSL-3/4، وتؤثر بشكل كبير على اختيار مواد الأرضيات والجدران. يجب أن تتحمل هذه المواد التعرض المتكرر للمواد الكيميائية القاسية وطرق التعقيم القاسية دون أن تتحلل أو تفقد خصائصها الوقائية.
إن القدرة على مقاومة مجموعة واسعة من المطهرات، بما في ذلك محاليل التبييض وبخار بيروكسيد الهيدروجين والفورمالدهايد، معيار رئيسي لجميع الأسطح في المعامل عالية الاحتواء. لا يجب أن تقاوم المواد الهجوم الكيميائي فحسب، بل يجب أن تحافظ أيضًا على سلامتها الهيكلية ومظهرها بمرور الوقت.
علاوة على ذلك، يجب أن تكون الأسطح غير مسامية وملساء لمنع تراكم الملوثات وتسهيل التنظيف الشامل. أي مادة يمكن أن تؤوي كائنات دقيقة أو يصعب تطهيرها غير مناسبة للاستخدام في بيئات BSL-3/4.
أصبحت المواد القائمة على الإيبوكسي، سواء للأرضيات أو طلاء الجدران، شائعة بشكل متزايد في مختبرات BSL-3/4 بسبب مقاومتها الاستثنائية لطيف واسع من عوامل إزالة التلوث وقدرتها على إنشاء أسطح غير ملحومة وغير منفذة.
تأمل هذه المقارنة بين مقاومة المواد لطرق إزالة التلوث الشائعة:
المواد | مقاومة التبييض | مقاومة بخار H2O2 للبخار | مقاومة الفورمالديهايد | مقاومة الأشعة فوق البنفسجية |
---|---|---|---|---|
إيبوكسي | ممتاز | ممتاز | ممتاز | جيد |
الفولاذ المقاوم للصدأ | ممتاز | ممتاز | ممتاز | ممتاز |
FRP | جيد | ممتاز | جيد | عادل |
الفينيل | عادل | جيد | عادل | فقير |
في الختام، يجب أن يعطي اختيار المواد لمختبرات BSL-3/4 الأولوية للتوافق مع بروتوكولات التطهير الصارمة. وهذا لا يضمن سلامة العاملين والبيئة فحسب، بل يضمن أيضاً طول عمر البنية التحتية للمختبرات وفعالية تكلفتها.
ما هي الابتكارات التي تشكل مستقبل مواد المختبر BSL-3/4؟
يتطور مجال بناء مختبرات السلامة البيولوجية باستمرار، مع ظهور مواد وتقنيات جديدة لتعزيز السلامة والمتانة والكفاءة. وتركز الابتكارات في مواد المختبر BSL-3/4 على إنشاء أسطح أكثر ذكاءً واستجابةً يمكنها المساهمة بفعالية في تدابير السلامة البيولوجية.
ويتمثل أحد مجالات الابتكار في تطوير أسطح ذاتية التطهير. تشتمل هذه المواد على عوامل مضادة للميكروبات أو خواص التحفيز الضوئي التي يمكنها تحييد العوامل البيولوجية بفاعلية عند ملامستها. وعلى الرغم من أن هذه التقنيات لا تزال في مراحلها المبكرة، إلا أنها تبشر بالحد من تواتر وكثافة إجراءات التطهير اليدوي.
وهناك اتجاه آخر يتمثل في استخدام تكنولوجيا النانو لتعزيز خصائص المواد الموجودة. يمكن للطلاء النانوي تحسين المقاومة الكيميائية، وزيادة المتانة، وحتى توفير قدرات الشفاء الذاتي للأسطح، مما يطيل من عمرها الافتراضي ويحسن من السلامة العامة.
تبرز المواد المركبة المتقدمة التي تجمع بين قوة مواد البناء التقليدية والمقاومة الكيميائية وقابلية التنظيف للبوليمرات عالية الأداء كحلول من الجيل التالي لبناء مختبر BSL-3/4.
فيما يلي لمحة عن بعض المواد المبتكرة لمختبرات BSL-3/4:
الابتكار | الميزة الرئيسية | الوضع الحالي | التأثير المحتمل |
---|---|---|---|
الأسطح ذاتية التطهير | الاختزال الميكروبي النشط | قيد التطوير | عالية |
طلاءات النانو | خصائص المواد المحسّنة | التبني المبكر | معتدل |
مانعات التسرب الذكية | قدرات الشفاء الذاتي | مرحلة البحث | عالية |
مواد المحاكاة الحيوية | مضاد طبيعي للميكروبات | المفاهيم | عالية جداً |
وفي الختام، فإن مستقبل مواد مختبرات BSL-3/4 مشرق، حيث تعد الابتكارات بجعل هذه المرافق الحيوية أكثر أمانًا وكفاءة وسهولة في الصيانة. ومع نضوج هذه التقنيات، يمكننا أن نتوقع أن نشهد تطورات كبيرة في تصميم وتشغيل المختبرات عالية الاحتواء.
كيف تؤثر المعايير التنظيمية على خيارات المواد لمختبرات BSL-3/4؟
تلعب المعايير التنظيمية دورًا محوريًا في تشكيل خيارات المواد لمختبرات BSL-3/4. تضمن هذه المعايير، التي وضعتها منظمات مثل مراكز مكافحة الأمراض والوقاية منها (CDC) ومنظمة الصحة العالمية (WHO)، أن تحافظ مختبرات الاحتواء العالي على أعلى مستويات السلامة البيولوجية والأمن البيولوجي.
إن الامتثال لهذه اللوائح ليس اختياريًا؛ فهو شرط أساسي لتشغيل مرافق BSL-3/4. وتغطي المعايير جوانب مختلفة من تصميم المختبرات وتشييدها، بما في ذلك متطلبات محددة للأرضيات ومواد الجدران.
أحد الاعتبارات الرئيسية في الامتثال التنظيمي هو القدرة على التحقق من فعالية إجراءات التطهير. يجب ألا تصمد المواد أمام هذه الإجراءات فحسب، بل يجب أن تسمح أيضًا بقياس موضوعي لنظافتها وعقمها.
يُعد دليل السلامة البيولوجية في المختبرات الميكروبيولوجية والطبية الحيوية (BMBL) الصادر عن مركز مكافحة الأمراض والوقاية منها (CDC) الوثيقة الأساسية التي توجه اختيار المواد اللازمة لمختبرات BSL-3/4 في الولايات المتحدة، مع التأكيد على الحاجة إلى أسطح غير مسامية وسهلة التنظيف يمكنها تحمل التطهير المتكرر.
فيما يلي نظرة عامة على كيفية تأثير المعايير التنظيمية على خيارات المواد:
الهيئة التنظيمية | المعيار الرئيسي | التأثير على المواد | التحقق من الامتثال |
---|---|---|---|
مركز مكافحة الأمراض والوقاية منها (الولايات المتحدة الأمريكية) | BMBL | عالية | عمليات التفتيش المنتظمة |
منظمة الصحة العالمية | دليل السلامة البيولوجية في المختبرات | عالية | التقييم الذاتي والتدقيق الخارجي |
PHAC (كندا) | معيار السلامة البيولوجية الكندي | عالية | عمليات التفتيش في الموقع |
الاتحاد الأوروبي | التوجيه 2000/54/EC | معتدل | رقابة السلطة الوطنية |
في الختام، يعد التنقل في المشهد التنظيمي أمرًا بالغ الأهمية عند اختيار المواد لمختبرات BSL-3/4. إن الامتثال لهذه المعايير لا يضمن السلامة فحسب، بل يسهل أيضاً التعاون العالمي والاعتراف الضروريين للأبحاث المتطورة في البيئات عالية الاحتواء.
كيف تدخل الصيانة وطول العمر في اختيار مواد المختبر BSL-3/4؟
تُعد الصيانة وطول العمر من العوامل الحاسمة في اختيار المواد لمختبرات BSL-3/4. ونظراً للتكاليف المرتفعة المرتبطة ببناء وتشغيل هذه المرافق، فإن اختيار المواد التي توفر أداءً طويل الأجل والحد الأدنى من متطلبات الصيانة أمر ضروري لأسباب تتعلق بالسلامة والاقتصاد على حد سواء.
يجب أن تتحمل المواد المستخدمة في مختبرات BSL-3/4 ليس فقط قسوة الاستخدام اليومي ولكن أيضًا إجراءات إزالة التلوث المتكررة والقوية. يمكن لهذا التعرض المستمر للمواد الكيميائية القاسية والإجهاد البدني أن يؤثر سلباً على الأسطح، مما قد يضر بسلامة الاحتواء إذا لم تتم إدارته بشكل صحيح.
تُعد المتانة طويلة الأجل مهمة بشكل خاص لأن التجديدات أو الإصلاحات في البيئات عالية الاحتواء معقدة ومكلفة ويمكن أن تعطل أنشطة البحث الهامة. ولذلك، فإن المواد التي تحافظ على خصائصها الوقائية على مدى فترات طويلة تحظى بتقدير كبير.
وقد برزت أنظمة الأرضيات الإيبوكسية عالية الأداء وألواح الجدران المصنوعة من البولي إيثيلين عالي الأداء كخيارات مفضلة في مختبرات BSL-3/4 نظرًا لمتانتها الاستثنائية، مع عمر افتراضي متوقع يتراوح بين 15 و20 عامًا في ظل أنظمة الصيانة المناسبة.
ضع في اعتبارك هذه المقارنة لمتطلبات الصيانة وطول العمر الافتراضي لمواد المختبر الشائعة BSL-3/4:
المواد | تواتر الصيانة | العمر المتوقع | تعقيد الإصلاح |
---|---|---|---|
أرضيات الإيبوكسي | الفحص السنوي | 15-20 سنة | معتدل |
ألواح الجدران المصنوعة من البولي بروبيلين المقوى بالفلين | الفحص نصف السنوي | أكثر من 20 عاماً | منخفضة |
الفولاذ المقاوم للصدأ | التنظيف ربع السنوي | أكثر من 30 عامًا | عالية |
أرضيات الفينيل | تنظيف عميق شهرياً | 10-15 سنة | معتدل |
وفي الختام، يجب أن يوازن اختيار المواد لمختبرات BSL-3/4 بين التكاليف الأولية ومتطلبات الأداء والصيانة على المدى الطويل. وغالبًا ما يثبت الاستثمار في المواد عالية الجودة والمتينة أنه أكثر فعالية من حيث التكلفة على مدى عمر المرفق، مما يضمن استدامة السلامة والكفاءة التشغيلية.
بينما نختتم استكشافنا للمواد المستخدمة في مختبرات BSL-3/4 للأرضيات والجدران، من الواضح أن عملية الاختيار معقدة ومتعددة الأوجه. يجب أن تفي المواد المختارة بمتطلبات السلامة الصارمة، وتتحمل إجراءات التطهير الصارمة، وتوفر متانة طويلة الأجل في بيئة عالية المخاطر.
تشمل النقاط الرئيسية المستخلصة من مناقشتنا ما يلي:
- الأهمية الحاسمة للأسطح غير الملحومة وغير المنفذة في الحفاظ على الاحتواء.
- تفوق الأنظمة القائمة على الإيبوكسي للأرضيات بسبب مقاومتها للمواد الكيميائية وقابليتها للتنظيف.
- فعالية الألواح المصنوعة من البولي بروبيلين المقوى بالألياف الزجاجية ووحدات الخرسانة المسلحة المغلفة بالإيبوكسي لبناء الجدران في أماكن الاحتواء العالي.
- الدور الحيوي لمانعات التسرب في ضمان سلامة نظام الاحتواء.
- تأثير متطلبات إزالة التلوث على اختيار المواد وطول عمرها الافتراضي.
- الابتكارات الناشئة في مجال إزالة التلوث الذاتي والمواد الذكية التي تعد بتعزيز السلامة البيولوجية.
- ضرورة الالتزام بالمعايير التنظيمية في اختيارات المواد.
- أهمية مراعاة الصيانة طويلة الأجل والمتانة في عملية الاختيار.
مع استمرار تطور مجال السلامة البيولوجية، ستتطور المواد والتقنيات المستخدمة في مختبرات BSL-3/4 كذلك. يعد البقاء على اطلاع على هذه التطورات وفهم التفاعل المعقد للعوامل في اختيار المواد أمرًا بالغ الأهمية لأي شخص يشارك في تصميم أو بناء أو تشغيل مرافق عالية الاحتواء.
لأولئك الذين يبحثون عن حلول متطورة لبناء مختبر BSL-3/4, كواليا مجموعة شاملة من المنتجات المصممة لتلبية متطلبات السلامة البيولوجية الأكثر صرامة. خبرتهم في مواد أرضية وجدران مختبر BSL-3/4 مختبر BSL-3/4 يضمن تجهيز المختبرات بأحدث تقنيات السلامة والأداء.
من خلال إعطاء الأولوية للسلامة والامتثال والأداء طويل الأجل في اختيار مواد الأرضيات والجدران، يمكننا إنشاء مختبرات BSL-3/4 التي لا تلبي تحديات اليوم فحسب، بل تكون مهيأة أيضًا لاحتياجات السلامة البيولوجية في المستقبل.
الموارد الخارجية
- مستوى السلامة البيولوجية - ويكيبيديا - يقدم لمحة عامة عن مستويات السلامة البيولوجية، بما في ذلك متطلبات البناء لمختبرات BSL-3 و BSL-4.
- مستويات السلامة البيولوجية - ASPR - يحدد مستويات السلامة البيولوجية ومتطلبات المرافق لأنواع مختلفة من المختبرات.
- CDC LC تعلم سريع: التعرف على مستويات السلامة البيولوجية الأربعة - يقدم نظرة عامة سريعة على مستويات السلامة البيولوجية الأربعة، بما في ذلك متطلبات بناء المنشأة.
- معايير تصميم المستوى 3 للسلامة البيولوجية من UCOP UCOP - دليل شامل لتصميم مختبرات BSL-3، بما في ذلك مواصفات مواد الأرضيات والجدران.
- دليل متطلبات تصميم المعاهد الوطنية للصحة - على الرغم من أن هذا الدليل لا يركز حصريًا على مختبرات BSL-3/4، إلا أنه يوفر رؤى قيمة في تصميم المختبرات، بما في ذلك المواد اللازمة للمرافق عالية الاحتواء.
- دليل منظمة الصحة العالمية للسلامة البيولوجية في المختبرات، الطبعة الرابعة - دليل شامل حول ممارسات السلامة البيولوجية، بما في ذلك معلومات عن تصميم المختبر والمواد المستخدمة فيه.
المحتويات ذات الصلة:
- BSL-3 مقابل BSL-4: الاختلافات الرئيسية في مستويات السلامة في المختبرات
- مختبرات BSL-4 المدمجة: اتجاهات التصميم المبتكرة
- مقاومة المضادات الحيوية: تحريات مختبر BSL-3
- الكشف عن اختلافات مختبرات BSL-3 و BSL-4 المتنقلة
- حواجز السلامة البيولوجية: السمات المميزة لمختبرات BSL-3 و BSL-4
- مختبرات BSL-3/4 المعيارية: حلول النشر السريع
- مختبرات BSL-3+: الميزات المحسّنة للسلامة البيولوجية
- مستويات السلامة البيولوجية: المقارنة بين مختبرات BSL-3 و BSL-4
- مختبرات السلامة البيولوجية: الفروق بين BSL-3 و BSL-4